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產(chǎn)品展示Products
石蠟冰凍切片TUNEL凋亡熒光
石蠟冰凍切片TUNEL凋亡熒光
更新時間:2021-02-04
訪問量: 3204
廠商性質: 生產(chǎn)廠家

提供商: 上海研謹生物
服務名稱: 石蠟冰凍切片TUNEL凋亡熒光
規(guī)格: 實驗服務
周期: 1-2周
價格: 15元
收費標準/服務周期/提供結果:
歡迎咨詢詳談,我們會根據(jù)您的方案及需求制定詳細的服務協(xié)議。
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石蠟冰凍切片TUNEL凋亡熒光產(chǎn)品概述:

一、石蠟冰凍切片TUNEL凋亡熒光實驗原理:

dUTP缺口末端標記(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling,TUNEL) 法檢測細胞凋亡的原理是當細胞發(fā)生凋亡時,DNA內(nèi)切酶被激活,核小體間的基因組DNA被切斷,暴露的3-0H可以在末端脫氧核苷酸轉移酶(TerminalDeoxynucleotidyl Transferase, TdT)加上帶有熒光素FITC標記的dUTP,從而可以通過熒光顯微鏡進行檢測。

 

二、石蠟冰凍切片TUNEL凋亡熒光實驗意義:

1.TUNEL法是一種分子生物學與形態(tài)學相結合的研究方法,可對完整的單個凋亡細胞或者凋亡小體進行原位染色,可以準確反映細胞凋亡典型的生物化學和形態(tài)特征。

2.可用于石蠟切片、冰凍切片、培養(yǎng)的細胞等進行細胞凋亡檢測,靈敏度遠比一般的組織化學和生物化學方法要高。

3.操作簡便快捷,在細胞凋亡的研究中被廣泛采用。

 

三、TUNEL凋亡熒光實驗步驟:

1.石蠟切片TUNEL顯色法:

①石蠟切片常規(guī)脫蠟至水,脫蠟劑= =甲苯,至水劑乙醇;

②PBS漂洗3*5 min; .

③加入蛋白酶K工作液379C反應15-30 min, PBS漂洗3x5 min;

④4%多聚甲醛(pH7 4的PBS)室溫固定15-30 min, PBS漂洗3x5 min;

⑤浸入封閉液(3%H202)室溫封閉10 min, PBS漂洗3x5 min;

⑥參考使用試劑盒的說明書配制適量的TUNEL檢測液,其中含有TdT酶、熒光標記液、TUNEL檢測液;

⑦樣品上加入適量TUNEL檢測液,37°C避光孵育60 min, PBS漂洗3x5 min;

⑧選擇是否用DAPI復染細胞核;

⑨使用抗熒光淬滅封片液封片后在熒光顯微鏡下進行觀察。

 

2.冰凍切片TUNEL顯色法:

①新鮮組織經(jīng)處理后,立即在恒冷冰凍切片機內(nèi)切片,厚度為5~6 um;

②防脫玻片,貼片,室溫陰干約12h;③4%多聚甲醛(pH7 .4的PBS)室溫固定10 min,

PBS漂洗3x5 min;

④浸入封閉液(3%H20O2) 室溫封閉10 min, PBS漂洗3x5 min;

⑤浸入通透液(0.1%Triton X-100溶于PBS中),室溫通透30 S-2 min;

⑥參考使用試劑盒的說明書配制適量的TUNEL檢測液,其中含有TdT酶、熒光標記液、TUNEL檢測液;

⑦樣品上加入適量TUNEL檢測液,37°C避光孵育60 min, PBS漂洗3x5 min;

⑧選擇是否用DAPI復染細胞核:

⑨使用抗熒光淬滅封片液封片后在熒光顯微鏡下進行觀察。

 

四、結果展示

 

 

 

 

實驗完成周期及交付標準

1.實驗周期: 1-2周

2.交付標準:蠟塊、切片、染色圖片.實驗報告(實驗步驟、試劑、耗材等)

 

需確認的信息

1.樣本的種屬

2.樣本的類型(固定的組織or蠟塊or切片)

3.是否提供試劑盒

4.拍照要求

 

 

實驗代做服務:

 

免疫組化IHC染色實驗服務

細胞、組織TUNEL凋亡染色實驗服務

試劑盒免費代檢測

實驗室代做實驗項目

 

透射電鏡服務實驗服務

石蠟/冰凍切片TUNEL凋亡

核仁組成區(qū)嗜銀-AGNOR染色實驗服務

免疫共沉淀(CHIRP)實驗

RNA結合蛋白免疫沉淀(RIP)實驗代做

酶聯(lián)免疫(ELISA)技術服務

雞傳染性法氏囊病病毒VP2抗體診斷試劑盒

喹諾酮類快速檢測試劑盒

組織芯片/微陣列定制技術服務

 

染色質免疫沉淀分析(CLIP)實驗服務

 

多因子液相芯片技術(Luminex)實驗

免疫細胞化學ICC實驗服務

ATP/ADP檢測實驗服務

蛋白雙向(2-D)電泳實驗服務

蛋白相互作用分析

堿性磷酸酶染色實驗服務

PKC活性檢測實驗

非標定量實驗

(Label-free)

 

DIGE技術實驗服務

端粒酶活性檢測實驗

細胞生長曲線的測定

掃描電鏡服務

NF-KB p65活性檢測實驗

 

慢病毒包裝實驗服務

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