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GBC-SD+luc人膽囊癌細胞+luc傳代/復(fù)蘇技巧
點擊次數(shù):263 更新時間:2024-08-21

GBC-SD+luc人膽囊癌細胞+luc

Human gallbladder cancer cell ,GBCSD luc

貨號:YJ-0025a(STR(GBC-SD)鑒定)

價格: 3200.0

規(guī)格: 1*10 6

細胞介紹

GBC-SD 細胞株是王展明等2000年從一位61歲的男性低分化膽囊癌患者中建立的。 細胞的形狀有多邊形、紡錘形和正方形。 分泌CEACA19-9。倍增時間大約為21.4小時。 可移植到裸鼠。 生成的腫瘤與原發(fā)腫瘤相似。 在本庫通過支原體檢測。 在本庫通過STR檢測。

該細胞通過慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶Luc基因。

細胞特性

1 來源:膽囊癌 男

2 形態(tài):上皮細胞樣  貼壁生長

3 含量:>1x106  細胞數(shù)

4 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

5)  用途:僅供科研使用。

細胞篩選

該細胞為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染Luc的細胞,隨細胞傳代次數(shù)的增加,其Luc熒光強度會逐漸減弱。若實驗要求需要維持熒光強度,可以加入嘌呤霉素進行再次篩選。        

建議收到細胞后至少傳3代,凍存留種后再進行篩選。

初次進行細胞篩選時,建議加入終濃度為1ug/ml嘌呤霉素的完全培養(yǎng)基維持培養(yǎng),若無細胞漂浮或者漂浮較少,即可更換為含2ug/ml嘌呤霉素的完全培養(yǎng)基繼續(xù)篩選,以此類推,至最高藥物濃度為5ug/ml。若篩選過程中,漂浮細胞大于60%,則停止篩選,換成正常培養(yǎng)基培養(yǎng),至細胞密度約80%,可繼續(xù)加入同濃度嘌呤霉素進行篩選。當加入5ug/ml嘌呤霉素時細胞正常增殖,可停止篩選,用不含藥完全培養(yǎng)基正常培養(yǎng)。

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:

1) 準備:1640 基礎(chǔ)培養(yǎng)基(推薦:YJ-0002),優(yōu)質(zhì)胎牛血清10 %P/S 1 %

2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%

3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。

二.細胞處理:

1 凍存細胞的復(fù)蘇:

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,完全培養(yǎng)基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

2 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

GBC-SD+luc人膽囊癌細胞+luc.png


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實驗技術(shù)服務(wù):

 


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