二價鐵、三價鐵及總鐵離子的測定
（鄰菲羅啉分光光度法）
1、 原理
亞鐵離子在pH值3-9的條件下，與鄰菲羅琳反應(yīng)，生成桔紅色絡(luò)合離子，此絡(luò)合離子在pH值3-4.5時最為穩(wěn)定。水中三價鐵離子用鹽酸羥胺還原成亞鐵離子，即可測定總鐵。
2、 試劑
2.1、HAc-NaAc緩沖溶液（pH≈5.0）（提取液）：稱取136g醋酸鈉，加水使之溶解，在其中加入120 mL冰醋酸，加水稀釋至500mL。
2.2 、HCl溶液（1+1）。
2.3、鹽酸羥胺溶液（10%）：新鮮配制。
2.4、鄰二氮菲溶液（0.15%）：新鮮配制
2.5、鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制
鐵標(biāo)準(zhǔn)儲備液:準(zhǔn)確稱取0.7020g硫酸亞鐵銨(NH4)2Fe(SO4)2.6H2O],溶于1+1硫酸50mL中,轉(zhuǎn)移至1000mL容量瓶中,加水至標(biāo)線,搖勻.此溶液每毫升含鐵0.1mg.
吸取上述鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液10mL，移入100mL容量瓶中用水稀釋至刻度，此溶液為1mL含0.01mg鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液。
3、 儀器
3.1、分光光度計(jì)
4、 分析步驟
4.1標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
分別取0.01mg/ml鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液0、0.2、0.4、0.6、0.8、1mL于6只3mL比色管中，加水至約1mL分別依次加入0.2mL 10%鹽酸羥胺溶液，稍搖動；加入0.20mL 0.15%鄰二氮菲溶液及0.2mL HAc-NaAc緩沖溶液，加水稀釋至刻度，充分搖勻。放置10min后于510nm處，用比色皿，以試劑空白作參比，測其吸光度，以吸光度為縱坐標(biāo)，鐵離子毫克數(shù)為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
4.2提取液的測定
取提取液1mL于3mL離心管中，用鹽酸調(diào)節(jié)使水呈酸性，pH＜3，剛果紅試紙顯藍(lán)色。加熱煮沸10分鐘，冷卻后加10%鹽酸羥胺溶液0.2mL（測二價鐵時換成蒸餾水），搖勻，1分鐘后再加0.15%鄰菲羅琳溶液0.2mL，及0.2mL HAc-NaAc緩沖溶液后用水稀釋至刻度。10分鐘后于510nm處，以試劑空白作參比，測其吸光度。
5、 分析結(jié)果的計(jì)算
提取液中總鐵離子含量X（mg/L），按下式計(jì)算：
X=A/V×1000
式中：A----從標(biāo)準(zhǔn)曲線查得的鐵離子的含量，毫克；
V----提取液體積，毫升。
6、注釋
測二價鐵時提取液不加10%鹽酸羥胺溶液，測三價鐵時以總鐵減去二價鐵
7、允許差
提取液總鐵離子含量小于1mg/L時，平行測定兩結(jié)果差不大于0.03mg/L。
8、結(jié)果表示
取平行測定兩結(jié)果算術(shù)平均值，作為提取液的總鐵離子含量。
從2011年開始我們致力于在生命科學(xué)領(lǐng)域、生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)外包及論文潤色服務(wù)，協(xié)助客戶各類實(shí)驗(yàn)服務(wù)及論文潤色，是客戶您值得信賴的科研合作伙伴!
如果您受時間、試驗(yàn)條件等限制而無法完成您的課題研究，歡迎您與我們聯(lián)系。
實(shí)驗(yàn)代做服務(wù)：
